1927年1月，在中国共产党及苏联顾问鲍罗廷的支持下，国民党左派人士将国民政府自广州迁往华中的武汉，汪精卫出任国民政府主席。3月蒋取得上海及南京的控制权，与国民党左派人士决裂，发动清党、分共。4月12日，他清剿党内以个人名义加入之共产党员，许多人惨遭杀害，此事件又称“四一二事变”。随后，蒋在保守派拥护者支持下在南京另立“国民政府”，史称宁汉分裂。共产党员及其他左派人士被清出国民党，苏联顾问被驱逐。1928年6月国民革命军从军阀手中取得北京的控制权。

　　1927年到1937年的十年被称为“黄金十年”，是国民政府的巩固时期，蒋在此一时期获得一些成就。中国政府借外交手段处理了一些割让租界的问题，并收回部分外国在华享有的特权。政府积极进行了法律及刑罚系统的现代化、稳定物价、偿还国债、改革金融及货币系统、铺设铁路及建设公路、改善公共卫生设施、立法对抗毒品交易，以及提高工业及农业生产。教育方面所做的努力也有长足进步。为建立更融和的中国社会，蒋氏发起新生活运动，强调儒家道德价值，并且推行国语作为标准语言。广泛的建设通讯设施进一步激励人民的统一感及自豪感。然而这些成功所遭遇到的是接连不断、需要进一步政治上及军事上巩固的政治骚乱。蒋介石与其多数掌有军权的盟友进行争斗，1930年的中原大战几乎使国民政府破产，并造成近二十五万人员的伤亡，而1931年与胡汉民的决裂也使得国民政府摇摇欲坠。而农业改革的失利，更是直接导致了中国共产党在农村的壮大以及工农割据的形成。

　　1931年9月18日，日本入侵满洲（九一八事变），蒋提出宣传标语“先安内，后攘外”，意指政府应先击败内乱的共产党，而非直接迎击外来的日本。1936年，出身东北军阀、蒋重要盟友张学良，以及杨虎城发动西安事变，蒋被劫持，被迫同意和共产党一致抗日。1937年，他在芦沟桥事变后对日本宣战，对日抗战全面爆发。抗战结束后，国共合作破裂，国民党和共产党再次爆发内战。美国继续支持蒋介石对付毛泽东所领导的人民解放军。尽管蒋中正的国际地位大大提升，他所领导的国民政府却深受贪污及通货膨胀问题困扰。抗日战争严重削弱国民党的力量，在此同时，共产党却借着在农村地区进行的游击战，充实物资，取得民心，正规军由抗战初期的5万余人发展到抗战结束时的127万余人（大约是国民党军队的1/4），民兵达268万余人，与国民党形成了此消彼长的局面。

　　1947年中华民国宪法制宪完成，他被国民大会选为总统。由于经济、政治及军事各方面不得人心，国民党始终不能在内战中占优，节节败退，伤亡惨重。白崇禧要求蒋中正下台，蒋于1949年1月21日辞去总统职务，由副总统李宗仁任代理总统，与共产党进行和谈。和谈破裂，1949年12月10日一早，解放军包围了国民党在中国大陆最后控有的城市－成都，当时蒋介石与其子蒋经国坐镇成都中央军校指挥防御，同日父子二人搭乘美龄号军机撤往台湾，之后未再踏足中国大陆的土地。政府迁往台湾台北后，蒋中正于1950年（民国39年）3月1日复行中华民国总统职权。1954年5月20日再度当选中华民国总统， 1971年，中华人民共和国在联合国内代表中国席次此一议题获得多数国家的支持，蒋中正被迫接受美国的“两个中国”安排，然而中共坚持“台北不出，北京不入”，最后蒋在对内声称“汉贼不两立”下，于联合国通过第2758号决议前夕，宣布中华民国退出联合国。

　　蒋在1975年于台北逝世，享年88岁。蒋中正虽然在近代中国历史上占有举足轻重的位置，但他却未能如孙中山受到中国人民的爱戴和推崇。蒋介石处处针对共产党，很自然在中国大陆他的政策常被批评忽略抗日、妄顾民族利益。尽管如此，他对抗军阀统一中国、领导中国战胜日本的功劳普遍受到肯定。

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